上海光学仪器厂

显微镜教学四 复式光学显微镜的使用方法

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(1) 显微镜的取用

一手握镜臂,一手托住镜座,将显微镜轻轻放置在桌上,距桌缘约一个姆指距离之处.

调整坐椅至适当高度,使自己可以轻松地使用显微镜.

取 95% 酒精及拭镜纸,将所有镜头擦拭干净(※注意:仅能以单一直线方向擦拭).

将玻片标本平稳地放在载物台上,以玻片夹夹好(※注意:请确认是否夹好,以免玻片跳起,造成同学受伤或损及显微镜镜头).

(2) 低倍镜的使用

先将载物台降至最低点,转动旋转盘( Revolving nosepiece ),使低倍镜位于镜筒正下方.

打开光源,调整光源调整钮及光圈( Iris diaphragm ),使视野中之亮度适当.

将所要观察的玻片放在载物台上,以玻片夹夹好,并转动调节钮 ( mechanical stage control knobs ) 以调整玻片位置.转动调节轮 ( Adjustment knob ),至低倍镜与载物台相距约 0.1 cm(或载物台无法再上升)为止.

由接目镜观察,同时以靠向自己的方向缓缓转动调节轮( Adjustment knob ),使载物台下降,直到影像清晰为止.若视野太亮或太暗,皆可调整光源调整钮及光圈( Iris diaphragm ) ,使视野中之亮度适当.

(3) 高倍镜的使用

先使用低倍镜找到欲观察的目标,将该部位调整至视野中央.

重覆 “低倍镜的使用” 方法之A.~D..

(4) 油镜的使用

先使用高倍镜找到欲观察的目标,将该部位调整至视野中央.

将高倍镜转开,加一小滴油镜专用油( immersion oil ) 于所见物像范围的玻片上(即光线照亮的区域),换用100倍接物镜(即 oil immersion objective),小心将油镜浸于油中,重新调整光圈,并缓慢转动调节轮( Adjustment knob ),直到影像清晰为止.

(5) 注意事项

严忌单手提取显微镜.

若须移动显微镜,务必将显微镜提起再放至适当位置,严忌推动显微镜(推动时造成的震动可能会导致显微镜内部零件的松动,切记!!),使用显微镜请务必小心轻放.

使用显微镜时坐椅的高度应适当,观察时更应习惯两眼同时观察,且光圈及光源亮度皆应适当,否则长时间观察时极易感觉疲劳.

转动旋转盘时务必将载物台降至最低点,以免因操作不当而刮伤接目镜之镜头.

标本染色或其他任何操作皆应将玻片取下,操作完成后再放回载物台观察,切勿在载物台上操作,以免染剂或其他液体流入显微镜内部或伤及镜头.

观察完一种材料,欲更换另一种材料时,务必将载物台下降至最低点,换好玻片后再依标准程序重新对焦,切勿直接抽换标本,以免刮伤镜头或玻片标本.

显微镜使用前后皆应以拭镜纸 ( Lens paper ) 及 95% Alcohol清洁所有镜头,擦拭时应沿单一直线方向轻拭,不可旋转磨擦.

擦拭显微镜镜头时只能用拭镜纸 ( Lens paper ),切勿用其他纸张或手指接触镜头.

用毕显微镜应将载物台下降至最低点,并将低倍镜对准载物台中央圆孔处,将电源线卷好,盖上防尘罩,并收入存放柜中.

若长期不使用,应以 Xylene ( Xylol ) 清洁所有镜头.

显微镜教学三 显微镜简述

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人的肉眼由于先天的限制,在25 cm的明视距离下,只能分辨相距 0.2 mm 以上的两点（即解析力 ( resolving power ) 为 0.2 mm）,对于更微小的物体,就必须借助于显微镜。无论是何种显微镜,其主要功能都在于将影像放大 ( magnification ),并增加影像的明暗对比 ( contrast )。

显微镜种类繁多,依其呈像原理大致可以分为光学显微镜和电子显微镜两大类。两者差异如下表所示:

Table 2-4. A 光学显微镜与电子显微镜对比

增加光学显微镜影像的明暗对比的方法很多,例如利用染色法处理样本,或在显微镜上附加特殊装置（例如位相差显微镜 、暗视野显微镜 、干涉显微镜 、偏光显微镜、X光显微镜、萤光显微镜 、紫外光显微镜等）。

本学年同学将使用到的显微镜有双目镜复式光学显微镜 及双目镜解剖显微镜两种,以下将分别介绍其各部位的名称及功能。

(1) 双目镜复式光学显微镜

接目镜 :放大倍率为 10,可因应各人的双眼距离来调整,内安装有目镜测微尺,有些另装有指针,装有目镜测微尺的接目镜上有调节轮,可因应各人焦距来调整。

镜筒 :介于接目镜与接物镜之间。

旋转盘 :接于镜筒下方,通常有四个接孔,可接不同倍数的接物镜,本身可以旋转藉以更换不同倍数的接物镜。

接物镜:有scanning power objective ( 3.2)、low power objective ( 10)、high power objective ( 40)、oil immersion objective ( 100) 四种。

载物台:为放置标本玻片的平台,中央有一圆孔,可供光线通过。我们所使用的载物台为机械式载物台 ,上面有玻片夹及调节钮 ( mechanical stage control knobs ),可固定玻片及调整玻片位置。

集光器 ( Condenser ):位于载物台下方中央,由许多透镜组合而成,用以集合光线,使之投射于标本上。

光圈(虹膜) ( Iris diaphragm ):连接于集光器下方,上有一支调整柄 ( aperture diaphragm control ),可用以调整光圈孔径大小,以调整投射于标本上之光线强弱。

照明器 ( Illuminator ):位于镜座上,内设光源为钨丝灯,直接提供观察所需之光源。

镜臂 ( Arm ):连接镜筒及镜座,并供握取显微镜。

调节轮( Adjustment knob ):位于镜柱两侧,可调整载物台的升降,以供对焦。依顺时钟方向（远离自己身体方向）旋转,则载物台上升,反之则下降（＊注意:此方向有时依机型厂牌不同而异,也有调节轮是调节镜筒之升降者,首次使用时可先缓慢旋转试试看即可确定）。

镜座 ( Base ):显微镜之最底部。其右侧有光源调整钮,可调整照明器内光源亮度;后方接有电源线,有时尚有光源开关。

(2) 双目镜解剖显微镜 (Binocular dissecting microscope) (Stereomicroscope)

接目镜( Eyepiece ):放大倍率为 8( M1A 机型)或10( M3 机型 ),有些的接目镜上有调节轮( M3 机型 ),可因应各人焦距来调整。

镜筒 ( Body tube ):介于接目镜与接物镜之间。

接物镜( Objective ):M1A 机型只有1一种;M3 机型则有6.4、10、40三种,镜筒两侧有切换钮,可切换三种不同倍数的物镜。

调节轮( focusing knob ):位于镜柱两侧,可调整接物镜的升降,以供对焦。依顺时钟方向（远离自己身体方向）旋转,则接物镜上升,反之则下降。

镜柱( Pillar ):连接镜筒及镜座,并供握取显微镜。

照明器 ( Illuminator ):位于镜座上,内设光源为钨丝灯,直接提供观察所需之光源（※注意:由于此光源为热光源,使用时会发热,应避免直接接触照明器,以免烫伤）,开关在电源线上。

镜座 ( Base ):显微镜之最底部。其上有载物台,为一圆盘,有黑白两色,可依需要自行变换。

显微镜教学二 公制单位 —– 采十进位法

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各公制单位的名称及代表意义如下表所示：

Table 2-1. Metric Unit Values & Conversion（长度单位）

Table 2-2. Metric Unit Values & Conversion（重量单位）

Table 2-3. Metric Unit Values & Conversion（体积单位）

同学必须熟练各单位之间的转换,例如:

3.5 cm = 3.5 10-2 m

= 3.5 10-2 106 m m = 3.5 104 m m

转换单位之目的在于避免使用极大或极小之数字。

显微镜教学一

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显微镜观察

微生物顾名思义，就是十分微小的生命体。以人类肉眼是很难看见微生物的外观，更何况是研究其外部型态以及内部构造。因此在微生物学中，使用显微镜的观察十分重要。除了观看微生物的外观之外，许多的测试以及化学作用的呈色结果，都需要依靠显微镜的观察。

学习目标：于本次实验结束后你应该知道

各公制单位之名称、代表数值及各单位间的转换

复式光学显微镜 各部位的名称及功能

解剖显微镜各部位的名称及功能

比较复式光学显微镜及电子显微镜 之间的差异

字母e经过复式光学显微镜转换后之影像

如何计算视野直径及各镜头下之放大倍率

如何计算镜头下各细胞及标本之实际大小

依序写出使用复式光学显微镜观察之步骤

光学显微镜镜头的保养方法

油镜的使用方法及使用之后如何去除镜头及玻片上的油

显微镜课程大纲笔记

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普动实验第一堂课的内容是「复合显微镜的使用和维护」。虽然学生在国高中阶段几乎都用过显微镜，但是显微镜的使用方式还是得从头好好教一次。

课堂流程重点：

上课前先开显微镜箱的锁（之后上组织课程时亦然，请值日生先把所有柜子打开，节省上课中的移动、开锁时间）

显微镜课程开始前，让学生先拿出显微镜。

注意：

(1)桌面净空；

(2)用双手拿显微镜：一手拿镜臂，一手托底座；

(3)小心轻放，严禁於桌面拖行；

(4)防尘套与眼罩放回显微镜箱中；

(5)只能碰触有烤漆和有刻纹的地方；

(6)先不要插上电源

讲解顺序、内容。对照部位讲解功能原理，先讲课再逐步操作。

讲光圈时谈景深

NA（照孔数值）：直接看显微镜镜头上的数值，Lens 长度（改变入射角）

tube length

操作：step by step。

补充教材：