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如何解决偏光显微镜的偏振片

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立体显微镜与国际微观摄影比赛的渊源

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1碳纳米管，放大30倍，所用技术：立体显微镜。
2放大1300倍，图中，红色的是细胞壁，绿色和黄色的是淀粉颗粒。所用技术：共焦。
3单细胞盘基网柄菌，放大100倍，所用技术：立体显微镜。
4日本纸，放大100倍。图片上展示的范围比报纸上印刷的一个句号还小。拍摄技术：共焦。
5小叶甲虫，所用技术：立体显微镜。 

似梦似幻，疑假疑真，这些颜色艳丽、形状奇特的图像是什么？原来，它们都是通过显微镜的镜头拍摄下来的物体。虽然我们以前多少也听说过显微镜拍摄，但可能很少有人知道，显微镜拍摄还有一个国际性的摄影比赛呢。国际尼康微观世界比赛”《纽约时报》对此进行了跟踪报道。
所谓”微观世界”就是显微镜下的世界，该比赛于1974年设立，旨在推动并褒奖通过轻型显微镜进行摄影的活动。从那以后，这一”微观世界比赛”成为显微摄影爱好者的展示平台。一张显微照片可能是对科学或工业有重大意义的技术文件，但另一方面，一张好的显微照片也可以是一幅结构、颜色和内容都非常美丽的艺术品，可以从很多层次上进行欣赏。此次比赛共有2000多张参赛作品，其中，获得第一名的是迈克尔·斯特林格拍摄的海底硅藻图片。斯特林格并不是专业的显微镜学家，事实上，他一直在用立体显微镜拍摄这些画面，他说使用立体显微镜拍摄硅藻已经是自己生活一部分了！目前，他在英国的小岛上继续着自己的硅藻收集与分类工作。斯特林格的这幅作品并没有表现硅藻的细节，而是用一种诗意的方式呈现它的动感。
工欲善其事，必先利其器！当然欣赏之余我们不妨了解下立体显微镜，考虑到立体显微镜种类繁多，作者就不细写了，推荐大家点击：体视显微镜。

探索多光子荧光显微镜

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上世纪90年代对三光子显微镜进行了探索，但当时的激光技术限制了它的应用。但是现在，随着激光技术的进步，科学家开始再次挖掘这一技术的潜力，并透过大脑看到前所未有的深度。当康奈尔大学的物理学家ChrisXu还是康奈尔的研究生时，他就开始了多光子荧光显微镜的研究工作，那时是上世纪90年代。，这一技术在当时是全新的，因为那时WinfriedDenk，WattWebb和JimStrickler开发的双光子显微镜才刚刚面世。尽管当时对三光子的潜力已有了解并着手正在开发，但由于激光技术尚不成熟，三光子无法有效发挥其作用。结果，双光子荧光显微镜就成了主流。

足够强大

多光子荧光显微镜（MFM）生成高分辨率的图像，具有无与伦比的高选择性，它仅对被荧光染料标记的物体成像。与共聚焦荧光显微镜相比，MFM的优点是能够对更深层次的组织进行成像。这种技术尤其受神经生物学家的欢迎，因为这使得他们能够对单个突触进行成像，能够用于脑切片或活体、完整的实验动物。

“如果你真想知道大脑在干什么，你得在细胞水平上进行观察。”KevinEliceiri说，Kevin是威斯康星大学麦迪逊分校光学显微镜高级专家以及光学和计算仪器实验室主管。”多光子显微镜是你能以高分辨率观察深部组织内的细胞运动的唯一方法。

“要运行MFM，研究者首先需要向样本内引入荧光团。这种化学物质是一种染料，在激发状态下会发射荧光。然后聚焦激光束通过光栅针孔形成点光源，发射出长波长的光子，当多光子（双光子显微镜为两个光子，三光子显微镜则为三个光子）同时被吸收后，荧光团中的电子被激发至更高的能量状态。随着电子的衰减，它发射出荧光信号，然后被显微镜捕获。在MFM中，激发波长较辐射波长长–这和传统的荧光显微镜正好相反。

但和这一技术所能带给我们的惊喜一样，它也有缺陷，特别是考虑到散射和折射率的问题，它到底能看得多深？如果研究者使用长波长的光子，他们可以穿透更深的标本进行成像，因为这样的光子不易发生散射。当波长接近1300nm范围时，样本中的水开始吸收光子，光子于是变得没有用了。所以直到现在，三光子显微镜是否能替代双光子对更深的标本进行成像的问题还难以回答。

Xu的工作表明尽管存在水吸收窗，三光子荧光显微镜已足够强大，因此在很多情况下你依然能够看得很清楚。何况，更长的波长似乎并不像以前想象的那样会损伤细胞。

激光

激光技术的最新进展是三光子显微镜变得高效和可行的关键。继研究生阶段研究过多光子成像后，Xu在电信业研究光纤，这给了他激光技术方面的宝贵经验。”我们创造了我们自己的激光系统，”Xu说。”有了这个系统，就不再需要那么大的功率，只需20毫瓦便足以生成超高质量的图像了。这比双光子激光器的功率低多了。

“Xu开发的激光器拥有高脉冲能量低脉冲重复频率，比标准的双光子的钛蓝宝石激光器更有效，更适合三光子显微镜。开始的时候，他用光纤激光器产生了一种1550nm波长的激光，这是电信行业的标准波长。然后，他利用光子晶体杆移动激光波长至1700nm，通过形成一种称为孤波的波将能量放大100，000倍，这使得激光以恒定速率运动时保持波形不变。

这个杆是一种有着特殊外围结构的玻璃，因此当激光穿过它时，能保持其空间分布。”我知道杆越大，光纤越多，能量也越多。所以我在想，我们到底能把它变得多大？在这个方向上我们能走多远？”Xu回忆道。于是他和共同作者FrankWise共同探讨了他的想法，Frank也是康奈尔大学的一名物理学家。”‘我有一个好主意，'”Xu告诉Wise。’我需要一个大而长的杆来产生孤波，我能让这一能量变得非常有用。'[Wise]说，’哦，我有一个这样的杆’，事实上，我们第二天就找到了它，发射了一次脉冲，是的，能量就上去了。

“除了Xu，其他研究人员也开始再次研究三光子荧光显微镜。2012年2月，英国格拉斯哥斯特莱斯克莱德大学的物理学家GailMcConnell及其同事在《显微镜学杂志》上发表的文章表明，他们的三光子显微镜也能安全而有效地产生图像。

和Xu一样，McConnell也开发了一套她自己的三光子显微镜激光器，她开发的是一种双向抽运的光学参量振荡器。除了和Xu的激光器一样是一种发射1500nm波长激光的光纤激光器，McConnell的激光器还有另外一个特征：可调节性。因此她能够调节波长，这给了她一定的灵活性。

尽管她的团队有一些未发表的研究结果，是关于对哺乳动物细胞进行的观察，他们已发表的论文是对植物细胞进行成像，表明细胞并没有因为功率的增加而受到损伤。”我们可以想象四光子，”她说，”相比而言，用钛蓝宝石激光器五分钟后就会看到损伤。”下一步，McConnell说，是要将分辨率提至更高，这是他们实验室正在积极努力的方向。

三个，四个还是更多个

如果三光子能够做得好，为什么不用四个呢？额，如果是四光子，那么你需要更多的光子和更明亮的激光，这会对细胞产生更大的损伤。考虑到这一技术是专门用于对活体进行成像，那这种损伤就有问题了。”这么做你可能需要一些条件，”Xu说。”你需要重新进行优化。我们还没有达到三光子的深度极限。

“总体而言，在开发和优化三光子显微镜的过程中，相当多的潜力还有待挖掘，据Xu说。”我们能够开发出更好的对比试剂，更好的光学设备，还可能用更少的功率获得同样的信号，以及优化收集光子的系统。我们也许可以每件事情都做得比现在好一个数量级，加起来就比现在好1000倍了，这可不是一点点。”因为现在，三光子似乎拥有最好的吸收和散射平衡。显而易见，Xu和McConnell的工作引起了兴奋。”这两篇文章都表明了三光子显微镜拥有巨大的潜力。”Eliceiri说。”这份工作指出了考察其他波长的重要性，应该要做些试验看看都能得到些什么结果。但这篇文章表明红外真的很有希望。”有了这一新的工具，就能对脑中深部的单个神经元产生高分辨率的三维图像，科学家很可能会对大脑是如何工作的知道得更多。

想要了解更显微镜的知识可以点击我们的：业内新闻

普通光学显微镜问题指导

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普通光学显微镜问题指导：下图为本公司产品59XB 双目透射偏光显微镜作为示范指导！

一、 正确安装的问题，使用显微镜前，首先要把显微镜的目镜和物镜安装上去。目镜的安装极为简单，主要的问题在于物镜的安装，由于物镜镜头较贵重，万一学生安装时螺纹没合好，易摔到地上，造成镜头损坏，所以为了保险起见，强调学生安装物镜时用左手食指合中指托住物镜，然后用右手将物镜装上去，这样即使没安装好，也不会摔到地上。

二、正确对光的问题，对光是使用显微镜时很重要的一步，有些学生在对光时，随便转一个物镜对着通光孔，而不是按要求一定用低倍镜对光。转动反光镜时喜欢用一只手，往往将反光镜扳了下来。所以教师在指导学生时，一定要强调用低倍镜对光，当光线较强时用小光圈，平面镜，而光线较弱时则用大光圈，凹面镜，反光镜要用双手转动，当看到均匀光亮的圆形视野为止。光对好后不要随便的移动显微镜，以免光线不能准确的通过反光镜进入通光孔。

三、正确使用准焦螺旋的问题，使用准焦螺旋调节焦距，找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步，也是学生感觉最为困难的一步。学生在操作中极易出现以下错误：一是在高倍镜下直接调焦；二是不管镜筒上升或下降，眼睛始终在目镜中看视野；三是不了解物距的临界值，物距调到 2 ～3厘米时还在往上调，而且转动准焦螺旋的速度很快。前两种错误结果往往造成物镜镜头抵触到装片，损伤装片或镜头，而第三种错误则是学生使用显微镜时最常见的一种现象。针对以上错误，教师一定要向学生强调，调节焦距一定要在低倍镜下调，先转动粗准焦螺旋，使镜筒慢慢下降，物镜靠近载玻片，但注意不要让物镜碰到载玻片，在这个过程中眼睛要从侧面看物镜，然后用左眼朝目镜内注视，并慢慢反向调节粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看到物像为止，同时向学生说明一般显微镜的物距在1 厘米 左右，所以如果物距已远远超过 1 厘米，但仍未看到物象，那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋过快，此时应调整装片位置，然后再重复上述步骤，当视野中出现模糊的物象时，就要换用细准焦螺旋调节，只有这样，才能缩小寻找范围，提高找到物象的速度。

四、物镜转换的问题，使用低倍镜后换用高倍镜，学生往往喜欢用手指直接推转物镜，认为这样比较省力，但这样容易使物镜的光轴发生偏斜，原因是转换器的材料质地较软，精度较高，螺纹受力不均匀很容易松脱。一旦螺纹破坏，整个转换器就会报废。教师应指导学生手握转换器的下层转动扳转换物镜。

五、光学玻璃清洗的问题，光学玻璃用于仪器的镜头、棱镜、镜片等。在制造和使用中容易沾上油污、水湿性污物、指纹等，影响成像及透光率。清洗光学玻璃，应根据污垢的特点、不同结构，选用不同的清洗剂，使用不同的清洗工具，选用不同的清洗方法。清洗镀有增透膜的镜头，如照相机、幻灯机、显微镜的镜头，可用20% 左右的酒精和 80%左右的乙醚配置清洗剂进行清洗。清洗时应用软毛刷或棉球沾有少量清洗剂，从镜头中心向外做圆运动。切忌把这类镜头浸泡在清洗剂中清洗，清洗镜头时不要用力擦拭，否则会损伤增透膜，损坏镜头。清洗棱镜、平面镜的方法，可依照清洗镜头的方法进行。使用上述清洗剂也能清洗光学玻璃上的油脂性雾、水湿性雾和油水混合性雾，其清洗方法和清洗镜头的方法相似。光学玻璃表面发霉，是一种常见现象。当光学玻璃生霉后，光线在其表面发生散射，使成像模糊不清，严重者将使仪器报废。光学玻璃生霉的原因多是因其表面附有微生物孢子，在温度、湿度适宜，又有所需”营养物”时，便会快速生长，形成霉斑。对光学玻璃做好防霉防污尤为重要，一旦产生霉斑应立即清洗。

奥林巴斯CX21扫描电镜的构成

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奥林巴斯CX21扫描电镜的构成

奥林巴斯生物显微镜有一个结构比较待殊的聚光镜。列几个因素。在它的设计中要求考虑下

首先，透镜内膛应有足够空间以便容纳扫描线圈和消像散器等组件。

其次，团聚光镜的缩小作用使各级透镜处的物距Pj远大于其像距q，故惨距近似等于焦距在高分辨工作中为减小象差，扫描电镜末透镜的焦距应尽可能短。这就要求样品几乎应直接放在透镜极靴下面。

第三，为了有效收集二次电子，而二次电子的能量仅为数ev，所以样品必须处于弱磁场区。这就要求物镜磁场在极靴孔以下能迅速减弱，而收集二次电子的探测器必须对准并靠近样品。

综合以上各点，奥林巴斯生物显微镜的当前扫描电镜的韧镜都采用非对称型结构，即上极靴孔直径（例如40mm）比厂极靴孔直径（如4mm）大得多。在透镜内膛中设置两组扫描线圈5、和5z（每组含f和y两方向的偏转线圈）。下极靴面到样品中心的垂直距离通常称为工作距离W。图中的2是电子束的等效投影中心。这种结构的透镜所产生的磁场强度在下极靴的上、下平面处相差约100倍。

前面已经提到，末光闲的引入是为了改进图像质量，包括图像的分辨率和景深。奥林巴斯生物显微镜由于扫描电镜采取的是逐点成嫁原理，因此不难想象对样品的分辨串与样品上束斑的大小有关。电子透镜中的球差、色差、衍射差等因素，使实际柬斑比理想柬斑更大。从亮度不变原理可以知道，当束流一定时。束班的大小受末透镜对样品所张的有效孔径角oP所制。

奥林巴斯生物显微镜的在决定实际束斑的各因素中，计算表明，总效果是实际束斑近似正比于只。故电镜末透镜的焦距不能太大。常规扫描电镜中的／3约为lomm，末光阑孔的最佳半径rm约为25—50Pm。如果光阑孔过小或过大，都会使束斑增大，从而影响图象分辨率。但是小光阑孔决定了小孔径角，从而可提高系统的景深。而大光嗣孔可以容纳更多束流通过，有利于作成分分析。因此用户可根据不同的工作要求，自由选择孔径不同的末光阑片。实际工作中，除直接选用不同的光阑外，还可通过调节样品台的高度来实现电子柬的不同孔径角。位于不同工作距离处的样品，只要配合使用相应的透镜激励电流，使电子束正好聚焦在样品面上，都能得到清晰的像。

奥林巴斯生物显微镜的扫描电镜电子枪的高压不及透射电镜中那样高，通常设定在1—50kv。电子枪的阴极可以是热钨丝型的，但近年来已更多采用IjB6阴极，部分电镜上采用场发射枪，甚至肖特基热场发射枪。以热钨丝阴极为例，在前述加速电压下电子发射所形成的光源最小交叉截面区直径为10一50ym。为了保证较好的分辨率，必须将它们经聚光镜多级缩小，在样品表面处形成直径为1—10nm、束流为10”一10”A的电子探针。有些工作p如电子探针微区成分分杆．要求柬流高达lo“一lo—’A．则电子探针的直径应增至o．1—1Pm。从上述要求出发，奥林巴斯生物显微镜的扫描电镜中的聚光系统常由三级电子透镜组成，使束斑缩小率可达I／5000的量级。因末级聚光镜系紧邻样品上方，且在结构设计等方面有一定特殊性，故常把它单独列出，称为物镜。但它与进射电镜中位于物样下方的物钥是不同的。

奥林巴斯生物显微镜表承扫描电镜镜筒中的电于光路。可以看出各级透镜处都有固定光闹，其孔径约为2mm。它们的作用是挡掉—大部分无用的电子，为防止它们在镜筒个引起漏电或其他麻烦，末透镜处还有一个可更换光闹，通常有三或四个不同孔径（50一150Fnl）的光闹排列在光嗣板上以供选用。顺便指出，图中各级光阑的尺寸并不符台真实比例，只是定性表示它们的作用。可更换光阑的孔径比固定光阑小得多，它的作用在于改善图像质量。由于电子枪发射的电子流经各级光阅片的拦截，所以到达样品处的电子流数量极微。

介绍XDS-1B倒置显微镜的荧光图像

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XDS-1B倒置显微镜介绍其图像荧光显微镜所看到的荧光图像，一是具有形态学特征，二是具有荧光的颜色和亮度，在判断结果时，必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标，即凭工作者目力观察。作为一般定性观察，基本上可靠的。随着技术科学的发展，在不同程度上采用客观指标记录判断结果，如用细胞分光光度计，图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果，也必须结合主观的判断。

荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要，由于荧光很易褪色减弱，要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片如ASA200以上或24。以上。因紫外光对荧光猝灭作用大，如FITC的标记物，在紫外光下照射30s，荧光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。

XDS-1B倒置显微镜介绍其染料

吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。

EB：染色DNA和RNA

荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光，无极性，可透过完整的原生质膜。一旦进入原生质体后，由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光，无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中，避光4℃下贮存，使用时取0.22mlFDA贮存液加入5ml0.65mol/L甘露醇中.使用时，使最终浓度为0.01%。

荧光染料Ho33342和若丹明123：活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。XDS-1B倒置显微镜提示，一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。

显微镜物镜的基本参数和说明

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一、数值孔径(NA) 子午光线能进入或离开纤芯(光学系统或挂光学器件)的最大圆锥的半顶角之正弦,乘以圆锥顶所在介质的折射率,数值孔径是判断物镜性能(分辨率、焦深、亮度等)的重要指数。数值孔径又叫镜口率,简写为NA。它是由物体与物镜间媒质的折射率(n)与物镜孔径角的一半(θ\2)的正弦值的乘积,其大小由下式决定:NA=n×sinθ/2。

数值孔径简写NA(蔡司显微镜的数值孔径简写CF),数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者(尤其对物镜而言)性能高低(即消位置色差的能力,蔡司公司的数值孔代表消位置色差和倍率色差的能力)的重要标志。其数值大小分别标在物镜和聚光镜的外壳上。

孔径角又称”镜口角”,是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度。孔径角越大,进入物镜的光通亮就越大,它与物镜的有效直径成正比,与焦点的距离成反比。显微镜观察时,若想增大NA值,孔径角是无法增大的,唯一的办法是增大介质率n值。基于这一原理,就产生了水浸系物镜和油浸物镜,因介质的折射率n值大于1,NA值就能大于1。数值孔径最大值为1.4,这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前,有用折射率高的溴萘作介质,溴萘的折射率为1.66,所以NA 值可大于1.4。与其他参数的关系:数值孔径是显微镜物镜的重要参数,决定了物镜的分辨率。与物镜的放大倍数,工作距离,景深有直接关系。一般来说,它与分辨率成正比,与放大率成正比,焦深与数值孔径的平方成反比,NA值增大,视场宽度与工作距离都会相应的变小。    容易产生的误区:数值孔径与分辨率成正比,但这并不是说在选择物镜的时候一定要选择数值孔径(NA)最大才是最好,因为物镜还会有很多其他重要参数,比如荧光透过率、工作距离等等,最好根据自己的实验选择。

二、焦深 焦深也叫景深,其定义是:指使用显微镜观察和拍摄样品表面时,从对准焦点的位置开始,改变物镜与样品表面的距离时,对焦能够保持清晰的范围。肉眼的调整能力因人而异,所以焦深也会出现因人而异的情况。现在常用的是与实验结果比较一致的Berek 公式。

三、齐焦距离 齐焦距离是指,对准焦点时的物镜镜体定位面到物体表面的距离。OLYMPUS UIS2/UIS光学系统物镜的齐焦距离为45 mm,ZEISS ICCS光学体统、LEICA HC光学系统的齐焦距离也是45mm,NIKON CFI 60 光学系统的齐焦距离是60mm。 齐焦距离示意图：

四、工作距离 工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。    镜检时,被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。因此,它与焦距是两个概念,平时习惯所说的调焦,实际上是调节工作距离。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。

五、分辨率 分辨率是指在物体表面能够分解的最小间隔。数值孔径(NA)越大,分辨率越高。通常,分辨率的大小可以用下式表示。

工具显微镜的几种分类和说明

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工具显微镜的构造

1、小型工具显微镜——它是由精密十字移动工作台及观测显微镜构成的,是属于小型工具显微镜,设计时是以容易使用为主,所以支柱不会倾斜,照明设备亦采简易型,虽然容易但和许多附属品相连接后,就能够增加各种测定工作。

2、大型工具显微镜——它的回转工作台是采装配式,亦由精密十字形移动台和观测显微镜制成的,穿透照明设备是采用离心照明,支柱和工作台一体成型可以左右倾斜,螺纹测定非常便捷。眼观测部装有投影装置,可从事投影像之观测。工具显微镜的测定：

1、直角坐标测定:测定时必须使测定物的直角坐标方向和十字形工作台的移动方向一致时方可进行测定。采用直角坐标测定时由十字移动工作台的移动量就可直接读取直角坐标值,若是大型工具显微镜,使用瞄准孔直角坐标测定上的像连接观测眼即可正确测定,而在进行测定物直角坐标方向和十字移动工作台之校正时,使用装设在大型工具显微镜上的装配式旋转工作台非常方便,至于小型工具显微镜只要旋转台附件即可。

2、角度测定:使用旋转工作台或角度观测透镜即可测定。一般而言角度观测透镜的精度较佳。

3、高度测定:虽然小型工具显微镜无法测定高度,但是若把量银装在支柱的上端,然后利用显微镜的上下移动量就可测定高度了。然而,由于焦点深度,支柱倾度及量银和光轴间等因素误差,欲正确测定相当困难。

4、孔径测定:一般是使用角度观测透镜测定,但大型工具显微镜则可使用重叠影象观测透镜或者光学探测子,就是使用重叠影象透镜,使生成的两种像重叠,接着在相对的一方亦然,于是由移动量即可显示孔的内径。假若是使用光学探测器,则先将它装设在3倍的对物透镜上,然后对准探测子和工作台的移动方向,再调整观测镜内之重叠线平行于观测透镜的十字线,而使测定子接触孔穴面。最后利用Y轴上的进给校正重叠线的逆向移动,并用X轴进给使重叠线夹住观测透镜的十子线,即可读取X轴上的测定值。相对侧的孔穴亦然,故有读取的差值再加上探测子的直径即可获得孔穴内径。

日本研发出低成本的全息显微镜组件

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日本的研究者开发出了一款可以记录如细胞等三维形状的高分辨率全息显微镜组件，它的成本仅250美元。

传统的显微镜是一个功能强大的工具，可以让小物体如细胞成像。但是使用过传统显微镜的人都知道知道它的局限性：一个小区域的观点和比较浅的景深。这使得它很难获得真正意义上的三维物体的形状图像。

解决这个问题比较好的办法是制作全息图。这里的想法是将雷射光，使用一个作为参考光束和反射其他的样品记录模式相移，这个过程需要使用数码相机记录。

重组光束产生干扰模式，可以分析获取样本的高分辨率三维信息。这种方法显然是强大的。传统的显微镜只记录在光的强度变化反射样本。全息技术可以记录样本和相位信息，所以可以储存更多的主题信息。与适当的图像处理软件。它可以改变深度的重点，正确的光学畸变和重建三维形状的样品。

此外数字全息显微镜有可能是令人难以置信的便宜。各研究小组创建设备只要1000美元左右。

今天，Atsushi Shiraki和几个朋友在日本木更津国家技术学院正在计划如何削减成本的进一步发展。这些人建立了一个数字全息显微镜使用网络摄像头，一个小型固体激光器，光学针孔和自由开放源码软件。总费用：250美元（光学针孔约占一半）。全机重量轻、携带方便，适合在手掌的手（详见下图）。

这是一个非常便携的设备，对于在从事研究领域的研究人员和学校是一个非常不错的低成本的选择。