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倒置生物显微镜工作原理及应用

常见问题

倒置生物显微镜是生物显微镜的分支，用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究，同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。比较普通生物显微镜：适合用于观察、记录附着于培养皿底部或悬浮于培养基中的活体物质，在食品检验、水质鉴定、晶体结构分析及化学反应沉淀物分析等领域也能发挥巨大作用。

XSP-37XBY 研究级倒置荧光三目生物显微镜

工作原理

折射和折射率
光线在均匀的各向同性介质中，两点之间以直线传播，当通过不同密度介质的透明物体时，则发生折射现象，这是由于光在不同介质的传播速度不同造成的。当与透明物面不垂直的光线由空气射入透明物体 (如玻璃)时，光线在其介面改变了方向，并和法线构成折射角。折射和折射率透镜是组成显微镜光学系统的最基本的光学元件，物镜目镜及聚光镜等部件均由单个和多个透镜组成。依其外形的不同，可分为凸透镜(正透镜)和凹透镜(负透镜)两大类。当一束平行于光轴的光线通过凸透镜后相交于一点，这个点称”焦点”，通过交点并垂直光轴的平面，称”焦平面”。焦点有两个，在物方空间的焦点，称”物方焦点”，该处的焦平面，称”物方焦平面”；反之，在象方空间的焦点，称”象方焦点”，该处的焦平面，称”象方焦平面”。光线通过凹透镜后，成正立虚像，而凸透镜则成正立实像。实像可在屏幕上显现出来，而虚像不能。凸透镜成象规律1. 当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象；2. 当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象；3. 当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象；4. 当物体位于透镜物方焦点上时，则象方不能成象；5. 当物体位于透镜物方焦点以内时，则象方也无象的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。

数码显微镜与普通显微镜的区别

技术支持

数码显微镜又叫数字显微镜、照相显微镜、摄像显微镜/视频显微镜或是CCD显微镜等众多不同的叫法。数码显微镜是一种结合传统光学显微镜及视像镜头而成的显微镜，也就是在普通光学显微镜上加上显微成像装置, 可以是数码相机，亦可以是显微摄像头。它是将显微镜看到的实物图像通过数模转换，使其成像在计算机上。 数码显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、普通的电视机完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。从而，我们可以对微观领域的研究从传统的普通的双眼观察到通过显示器上再现，从而提高了工作效率。主要用于教学用途。

数码显微镜的主要好处在于：传统的光学显微镜只能供一人使用，要分享显微镜的影像很困难，而要拍摄显微镜内的影像，亦往往需要用到特别的仪器帮助。然而，数码显微镜由于可以与电脑连接，使显微镜内的视像可以透过连接到课室的投影机播放，使课室内的学生可以一同观看影像。

数码显微镜可以减少眼睛疲劳、把观察到的景像拍摄并保存下来。而且可以实现低成本满足多人同时预览的需求。还可以实现测量、打印、拍照等多功能。

数码显微镜与普通显微镜之间的区别：

1.具有显微摄像功能，把观察到的显微效果保存下来，形成图文文件，可给相关部门互相传阅;普通显微镜只能通过目镜观察，不能进行显微摄像。

2.与电脑相接，可以实现多人同时观察;普通显微镜只能一人观察。

3.通过电脑屏幕预览，可以减少眼睛疲劳;普通显微镜则需要每时每刻通过目镜观察，容易造成眼睛过度疲劳。

4.数码显微镜的成像装置可以有测量，打印图文报告，录像等功能;普通显微镜只能单纯的进行显微观察。

5.数码显微镜是现代科学仪器仪表发展的一个新时代，具有很多普通显微镜没有的功能。它在科学研究、产品检测、教学演示、考古等方面都有迅速的发展。

显微镜观察粉尘颗粒

技术支持

做粉尘分析一般会做几个方面的研究：观察粉尘表面结构，测定粉尘的分散度，粉尘粒度的研究，粉尘颗粒计数等等。

那么针对不同方向的研究，所要求看到的粉尘大小和状态都不尽一样，在做何种实验的时候应该选用什么样的显微镜来进行观察，什么类型的显微镜最适合做什么粉尘样品的观察，可以配套什么软件对粉尘颗粒进行分析处理和研究。

首先，需对粉尘进行分类，关于粉尘有多种分类方法。
1、按物质组成分类：按物质组成粉尘可分为有机尘、无机尘、混合尘。有机尘包括植物尘、动物尘、加工有机尘；无机尘包括矿尘、金属尘、加工无机尘等。
2、按粒径分类、按尘粒大小或在显微镜下可见程度粉尘可分为：粗尘，粒径大于40?m,相当于一般筛分的最小粒径；细尘，粒径10~40?m，在明亮光线下肉眼可以见到；显微尘，粒径0.25~10?m，用光学显微镜可以观察；亚显微尘，粒径小于0.25?m，需用电子显微镜才能观察到。不同粒径的粉尘在呼吸器官中沉着的位置也不同，又分为：可吸入性粉尘即可以吸入呼吸器官，直径约大于10?m的粉尘；微细粒直径小于2.5?m的细粒粉尘，微细粉尘会沉降于人体肺泡中。
3、按形状分类、不同形状的粉尘可以分为：

（1）三向等长粒子，即长、宽、高的尺寸相同或接近的粒子，如正多边形及其他与之相接近的不规则形装的粒细子；

（2）片形粒子，即两方向的长度比第三方向长得多，如薄片状、鳞片装粒子；

（3）纤维形粒子，即在一个方向上长得多的粒子，如柱状、针状、钎维粒子；

（4）球形粒子，外形圆形或椭圆形。
4、按物理化学特性分类、由粉尘的湿润性、黏性、燃烧爆炸性、导电性、流动性可以区分不同属性的粉尘。如按粉尘的湿润性分为湿润角小于90。的亲水性粉尘和湿润角大于90。的疏水性粉尘；按粉尘的黏性力分为拉断力小于60Pa的不粘尘，60~300Pa的微粘尘，300~600Pa的中粘尘，大于600Pa的强粘尘；按粉尘燃烧、烛花 炸性分为易燃、易爆粉尘和一般粉尘；按粉料流动性可分为安息角小于30。的流动性好的粉尘，安息角为30。~45。的流动性中等的粉尘及安息角大于45。的流动性差的粉尘。按粉尘的导电性和静电除尘的难易分为大于1011Ω?cm的高比电阴粉尘，104~1011Ω?cm的叫比电阻粉尘，小于104Ω?cm的低比电阴粉尘。
5、其他分类中还有分为生产性粉尘和大气尘，纤维性粉尘和颗粒状粉尘，一次扬尘和二次性扬尘等。
目前国内外现有的粉尘粒度测定方祛,从原理上可分为三大类:显微镜法、沉降法和分级法。其中显微镜法是唯一可以观察和测量单个颗粒的方法,常被视为颗拉分析较完美的方法。
实例说明：利用显微镜粉尘分散度测定方法
（一）滤膜溶解涂片法
1、原理 将采有粉尘的滤膜溶于乙酸丁酯中，搅拌均匀，制成粉尘标本，在显微镜下计测。
2、试剂与器材 乙酸丁酯（CP），显微镜，目镜及物镜测微尺
3、操作步骤 采尘滤膜放在小烧杯中，加1—2ml乙酸丁酯搅拌均匀，制成粉尘标本。在400～600倍的放大倍率下，用目镜测微计测定粉尘粒子的大小。只少测定200个粒子，遇长经量长径，遇短径量短径。按＜2μm、2μm-、5μm-，＞10μm分挡进行记录，并求其百分比（%）。
（二）自然沉降法
1、原理 将含尘空气采集于沉降器内，使尘粒自然沉降在盖玻片上，制备标本、在显微镜下计测。
2、器材 格林沉降器，显微镜，目镜及物镜测微计
3、操作步骤 将盖玻片放在沉降器的凹槽内。将含尘空气臵于沉降器的圆筒内。水平静止3小时后，取出盖玻片，制备粉尘样品。测定粉尘粒子分散度时，自然沉降法与滤膜溶解涂片法的分散度计数方法相同。
根据各种不同的实验类型，可知对粉尘做研究可能会用到的显微镜类型有生物显微镜，金相显微镜，相衬显微镜，暗场显微镜，体视显微镜。不同显微镜可对粉尘做不同的分析和放大。

显微镜：http://www.shoif.com/old_version/industry/

体视显微镜使用方法

技术支持

立体显微镜又称“实体显微镜”或“解剖镜”，在观察物体时能产生正立的三维空间影像。立体感强，成像清晰和宽阔，又具有长工作距离，并是适用范围非常广泛的常规显微镜。操作方便、直观、检定效率高，适用于电子工业生产线的检验、印刷线路板的检定、印刷电路组件中出现的焊接缺陷（印刷错位、塌边等）的检定、单板PC的检定、真空荧光显示屏VFD的检定等等，配测量软件可以测量各种数据。

使用方法

无限远校正光学系统

常见问题

细菌抹片标本的制备

技术支持

1.抹片

根据所用材料不同，抹片的方法亦有差异

(1)固体培养物

用经酒精灯火焰烧灼灭菌后的接种环，蘸取无菌蒸馏水(无菌肉汤、生理盐水均可)一环于清洁无油脂的载玻片中央，再钩取细菌的固体接着物少许混于蒸镏水中，涂抹成直径为1—1．5cm大小的均匀菲薄的抹片。

(2)液体培养物

可直接用灭菌接种环钩取细菌培养液1．2环，涂抹于玻片上即可。但应注意净管底Iili物摇匀，以免影响涂片效果。

(3)组织涂片

用灭菌的剪刀镊子取被检组织一小块，以其断面在玻片上压印或涂抹成适当大小的薄片。如为肝脾组织，脓汁、血液、乳汁等可直接涂抹于玻片上。无论何种方法，切忌

2.干燥  将抹片置于空气中让其自然干燥

3.固定  固定的方 法因材料不同而异：

(1)火焰固定

细菌培养物抹片，常采用火焰固定法，即将已干

燥的抹片菌膜面向上，以钟摆速度在酒精灯火焰上通过数次(用手背触及抹片反面，以不烫手为宜)。

(2)化学固定

血液、组织等抹片常用此法固定，即以数滴甲

醇滴加在玻片上，固定3．5min。

抹片经固定后便粘附于玻片上而不易被水冲掉，并能改变细菌对染料的通透性，增加与染料的亲和力而更容易着色，同时多数细菌能被杀死。

显微镜测微尺的使用

技术支持

显微测微尺是用来测量标本物体大小、长短的工具。它分为目镜和物镜测微尺两种。目镜测微尺观察到的标本大小，必须通过物镜测微尺测得的数据换算后，才是标本的真实大小。

目镜测微尺是一圆形玻片，内有一把小尺，通常为5mm长，分为50小格。关键是一小格是多少微米。有的是10mm长，分为100小格的型号的，也是一样方法。

物镜测微尺是一特制的载玻片，中央有一小圆圈，圈内有一长度为1mm（1000微米）的小尺，它分为100小格，每小格为10微米。

使用方法：

1、目镜测微尺的校正

将目镜测微尺装入目镜的隔板上，旋下顶端透镜，将目镜测微尺放入（将有刻

度一面朝下），再旋紧顶端透镜并放入筒内。

将物镜测微尺有刻度的一面置于显微镜载物台上。使刻度朝上，对准光源，先用低倍镜观察寻找载物台上的物镜测微尺的刻度，找出后将目镜测微尺与物镜测微尺一端重叠对齐，使目镜测微尺的“0”点与物测微尺的某一刻度重合，即看看目镜测微尺占满物镜测微尺小格数，即可换算出标本究竟大小多少微米。

例如：目镜测微尺50小格占满物镜测微尺68小格（即为680微米），其计算方法是：680微米/目镜50小格=13.6微米，即为目镜测微尺每小格的长度为13.6微米。

注意事项

由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此，校正目测微尺时必须对特定的显微镜和附件进行校正，并且只能在特定的情况下重复使用，当需要更换放大倍数时，必须重新校正目测微尺每一格所代表的长度。

校正完毕后，一般在显微镜手把上标明此镜10×；40×；放大倍数的每小格目镜测微尺所代表的长度。

显微镜观察血液（人血涂片的制作）

服务支持

血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
涂片法制片是生物显微制片的基本方法之一。

取血步骤：
可分5个步骤进行
消毒→取血→推片→染色→观察

消毒与取血

消毒
先按摩取血部位，使血流通畅；再用酒精消毒采血针和取血部位（如指尖）。

待酒精干后，刺破皮肤，使血自然流出，勿挤。取干净载片，让血滴在离载片一端中4～5毫米处，注意手指持握载片的边缘，勿触及其表面。不能使载片接触取血部位的皮肤。

推片
取一块边缘光滑的载片做推片。将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°～40°角，向另一端平稳地推出，如右图所示。涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。

染色
用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。再将瑞氏染液(伊红-亚甲基蓝)滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染半分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。

观察
红细胞
淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。
颗粒白细胞
嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米。
嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10-15微米。
嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。直径10-11微米。

无颗粒白细胞
淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，核圆形。直径6-8微米。
单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。
血小板
血小板为不规则小体，直径2 – 3微米。其周围部分浅蓝色，中央有细小的紫红色颗粒，聚集成群。

注意事项
玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干备用。
使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐, 两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落, 因此血膜必需充分干燥。

XSP-BM7A 研究级三目生物显微镜

数码显微镜与普通显微镜的区别

常见问题

数码显微镜又叫数字显微镜、照相显微镜、摄像显微镜/视频显微镜或是CCD显微镜等众多不同的叫法。数码显微镜是一种结合传统光学显微镜及视像镜头而成的显微镜，也就是在普通光学显微镜上加上显微成像装置, 可以是数码相机，亦可以是显微摄像头。它是将显微镜看到的实物图像通过数模转换，使其成像在计算机上。 数码显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、普通的电视机完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。从而，我们可以对微观领域的研究从传统的普通的双眼观察到通过显示器上再现，从而提高了工作效率。主要用于教学用途。

数码显微镜的主要好处在于：传统的光学显微镜只能供一人使用，要分享显微镜的影像很困难，而要拍摄显微镜内的影像，亦往往需要用到特别的仪器帮助。然而，数码显微镜由于可以与电脑连接，使显微镜内的视像可以透过连接到课室的投影机播放，使课室内的学生可以一同观看影像。

数码显微镜可以减少眼睛疲劳、把观察到的景像拍摄并保存下来。而且可以实现低成本满足多人同时预览的需求。还可以实现测量、打印、拍照等多功能。

4XC-UV 定倍定标金相图像显微镜

数码显微镜与普通显微镜之间的不同，有下面的六大区别：

1.具有显微摄像功能，把观察到的显微效果保存下来，形成图文文件，可给相关部门互相传阅;普通显微镜只能通过目镜观察，不能进行显微摄像。

2.与电脑相接，可以实现多人同时观察;普通显微镜只能一人观察。

3.通过电脑屏幕预览，可以减少眼睛疲劳;普通显微镜则需要每时每刻通过目镜观察，容易造成眼睛过度疲劳。

4.数码显微镜的成像装置可以有测量，打印图文报告，录像等功能;普通显微镜只能单纯的进行显微观察。

5.数码显微镜是现代科学仪器仪表发展的一个新时代，具有很多普通显微镜没有的功能。它在科学研究、产品检测、教学演示、考古等方面都有迅速的发展。